✴️ Định lượng Homocystein

Homocystein (Hcy) là một acid amin chứa gốc sulfur được hình thành trong quá trình chuyển đổi methiomin thành cystein - Methionin là một trong các acid amin thiết yếu (acid amin không thay thế) không tự tổng hợp được mà phải lấy từ nguồn thức ăn. Methionin và Hcy tích lũy lại trong cơ thể dẫn đến nồng độ Hcy trong máu và nước tiểu tăng cao. Người bệnh có Hcy niệu có thế có biến dạng xương, bệnh lý ở mắt, chậm phát triển tinh thần, gan thoái hóa mỡ. Có nguy cơ cao bị huyết khối tĩnh mạch, vỡ xơ động mạch và dễ bị các bệnh tim mạch.

NGUYÊN LÝ

Dựa trên nguyên lý miễn dịch sử dụng công nghệ hóa phát quang. Để xác định nồng độ Hcy toàn phần trong huyết thanh/huyết tương theo phản ứng miễn dịch một bước. Kết quả phản ứng phát quang xảy ra, cường độ ánh sáng thu được tỷ lệ với nồng độ Homocystein có trong mẫu bệnh phẩm.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện: 01 cán bộ đại học chuyên ngành Hóa sinh miễn dịch và 01 kỹ thuật viên.

Phương tiện, hóa chất

Phương tiện

Các máy có thể phân tích: architect I 2000 và một số máy khác

Máy ly tâm

Tủ lạnh để bảo quản hóa chất và bảo quản QC, mẫu bệnh phẩm

Pipet các loại, ống sample cup

Ống nghiệm, đầu côn xanh và vàng

Giá đựng ống nghiệm

Hóa chất

Vi hạt: 1 hoặc 4 lọ x 5 mL Kháng thể -S-adenosyl L-homocysteine được bao phủ trên bề mạt các vi hạt trong dung dịch đệm Bis-Tris buffer. Nồng độ tối thiểu: 0. 1% solids; Chất bảo quản: sodium azide và các tác nhân kháng khuẩn khác.

Conjugate: 1 hoặc 4 lọ x 5. 7 mL S-adenosyl-L-cysteine (SAC) acridinium-được đánh dấu được gắn trên bề mặt trong dung dịch đệm citrate Nồng độ tối thiểu: 1 ng/mL và Chất bảo quản: ProClin 300.

Enzym: 1 hoặc 4 lọ x 8. 6 mL Recombinant S-adenosyl-L homocysteine hydrolase (SAHHase) in 4-(2-hydroxyethyl) piperazine- propane sulfonic acid (EPPS) buffer. Chất bảo quản: sodium azide.

Reductant: 1 hoặc 4 lọ x 21. 5 mL Dithiothreitol (DTT) trong dung dịch đệm citrate. Dung dịch hòa loãng chứa 100mL.

ARCHITECT i Multi- ssay Manual Diluent có chứa dung dịch đệm phosphat. Chất bảo quản: các tác nhân kháng khuẩn . Các loại thuốc thử, hóa chất khác:

ARCHITECT i Pre-Trigger Solution: Pre-trigger solution có chứa 1. 32% hydrogen peroxide.

ARCHITECT i Trigger Solution: có chứa 0. 35 N sodium hydroxide.

ARCHITECT I wash bufer: Wash buffer có chứa đệm phosphate. Chất bảo quản: là các tác nhân kháng khuẩn.

Các dụng cụ tiêu hao khác

Ống nghiệm

Găng tay, dây garo

Bông, cồn sát trùng, bơm tiêm hoặc kim lấy máu.

Người bệnh

Cần giải thích cho người bệnh và người nhà về mục đích và ý nghĩa của xét nghiệm. Người bệnh cần phối hợp để lấy máu theo đúng yêu cầu về thời gian và số lượng.

Phiếu xét nghiệm

Có y lệnh của bác sỹ lâm sàng ghi trên phiếu xét nghiệm.

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Lấy bệnh phẩm: 3ml máu tĩnh mạch lấy vào ống chống đông Lithium - heparin.

Tiến hành kỹ thuật

Chuẩn bị máy phân tích

Dựng đường chuẩn

Phân tích QC: ở cả 3 level. Khi QC đạt tiến hành phân tích mẫu

Phân tích mẫu

Mẫu bệnh phẩm nên được tiến hành phân tích trong vòng 2giờ

Mẫu sau khi ly tâm được chuyển vào khay đựng bệnh phẩm

Đánh số (hoặc ID của người bệnh); chọn test và vận hành theo protocol của máy

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

*Trị số bình thường

Nam: 7,4 – 15,7 µmol/L (1-2,12mg/L)

Nữ: 3,9 – 14,8 µmol/L (0,53 – 2mg/L)

*Tăng

Yếu tố nguy cơ mắc bệnh tim mạch

Đái Hcy bẩm sinh

Hút thuốc lá

Thiếu hụt các vitamin B₆; B₁₂; acid folic

NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

Các yếu tố gây nhiễu

Trị số Hcy có thể tăng ở người có tuổi và hút thuốc

Một số thuốc có thể làm tăng nồng độ Hcy như: carbamafepin, cycloserin, Methotrexat, Penicillamin, Phenytoin, Procarbafin.

Bệnh viện Nguyễn Tri Phương - Đa khoa Hạng I Thành phố Hồ Chí Minh

  facebook.com/BVNTP

  youtube.com/bvntp