MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ
Mục đích
Phát hiện các trực khuẩn Mycobacterium leprae còn goi là Bacillus Hansen (BH) bền vững với acid từ bệnh phẩm mảnh sinh thiết tổ chức da.
Nguyên lý
Do đặc tính kháng acid của Mycobacterium leprae nên khi được nhuộm bằng thuật nhuộm Ziehl-Neelsen và soi dưới kính hiển vi quang học, hình ảnh của Mycobacterium leprae sẽ có màu đỏ, các vi khuẩn và các tế bào (nếu có) không có đặc tính kháng acid sẽ xanh.
CHUẨN BỊ
Người thực hiện
Người thực hiện Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.
Người nhận định và phê duyệt kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh.
Phương tiện, hóa chất
Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.
Trang thiết bị
Máy chuyển.
Tủ an toàn sinh học cấp 2.
Máy đúc.
Máy cắt.
Bể nhuộm.
Tủ ấm 56 độ.
Kính hiển vi quang học.
Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)
|
STT |
Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao |
Đơn vị |
Số lượng |
|
1 |
Formaldehyt |
ml |
30,000 |
|
2 |
Toluen |
ml |
50,000 |
|
3 |
Cồn tuyệt đối |
ml |
50,000 |
|
4 |
Paraplasts |
gr |
40,000 |
|
5 |
Cassett đúc bệnh phẩm |
Cái |
3,000 |
|
6 |
Dao cắt bệnh phẩm sử dụng 1 lần |
Cái |
1,000 |
|
7 |
Lam kính |
Cái |
3,000 |
|
8 |
Lamelle |
Cái |
3,000 |
|
9 |
Keo gắn Lamelle (Bom Canada) |
ml |
1,000 |
|
10 |
Thuốc nhuộm fucshin |
ml |
20,000 |
|
11 |
Thuốc nhuộm xanhmethylen |
ml |
20,000 |
|
12 |
Cồn Acid 1% |
ml |
20,000 |
|
13 |
Nước cất |
ml |
300,000 |
|
14 |
Gạc 30x30 (cm) |
Cái |
1,000 |
|
15 |
Bộ giá đựng tiêu bản |
Cái |
0,003 |
|
16 |
Mũ |
Cái |
0,200 |
|
17 |
Khẩu trang |
Cái |
0,200 |
|
18 |
Găng tay |
đôi |
1,000 |
|
19 |
Dung dịch rửa tay |
ml |
20,000 |
|
20 |
Bút bi |
Cái |
0,020 |
|
21 |
Giấy in A4 |
tờ |
1,000 |
Bệnh phẩm
Mảnh sinh thiết tổ chức da.
Phiếu xét nghiệm
Điền đầy đủ thông tin theo mẫu phiếu yêu cầu.
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.
Lấy bệnh phẩm
Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh (Xem Phụ lục 1 và Phụ lục 6).
Tiến hành kỹ thuật
Cố định bệnh phẩm trong formon.
Chuyển đúc bệnh phẩm.
Cắt bệnh phẩm.
Nhuộm bệnh phẩm theo phương pháp nhuộm Ziehl – Neelsen.
NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Dựa vào số lượng, độ tập trung của trực khuẩn kết hợp với đặc điểm mô bệnh học trên nhuộm tiêu bản nhuôm HE để chẩn đoán các thể.
NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
Trực khuẩn bị mất lớp mỡ do bước tẩy nến bằng xylen.
Khắc phục: phủ lại lam bằng dung dịch xylen với parafin tỷ lệ 1:1.
Bệnh viện Nguyễn Tri Phương - Đa khoa Hạng I Thành phố Hồ Chí Minh
