Mycoplasma hominis nuôi cấy, định danh và kháng thuốc

✴️ Mycoplasma hominis nuôi cấy, định danh và kháng thuốc

MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ

Mục đích:

Phát hiện và định danh M.hominis bằng phương pháp nuôi cấy.

Xác định mức độ nhạy cảm với kháng sinh của M.hominis.

Nguyên lý

Vi khuẩn được định danh dựa vào đặc điểm nuôi cấy, một số tính chất chuyển hóa.

Mức độ nhạy cảm với kháng sinh của M. hominis được xác định bằng phương pháp cấy trong canh thang đã có sẵn lượng kháng sinh nhất định. Đánh giá mức độ nhạy cảm với kháng sinh tùy theo khả năng mọc của vi khuẩn trong môi trường có chứa kháng sinh.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành vi sinh.

Người nhận định và phê duyệt kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành vi sinh.

Phương tiện, hóa chất:

Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.

Trang thiết bị:

Tủ ấm CO2.

Tủ an toàn sinh học cấp 2.

Bàn phụ khoa.

Đèn phụ khoa.

Kính hiển vi quang học.

Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

Ghi chú:

Chi phí nội kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình nội kiểm (QC) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lượng ≥ 10 mẫu cho 1 lần tiến hành kỹ thuật).

Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm).

Bệnh phẩm:

Dịch, mủ: Dịch cổ tử cung, niệu đạo…

Phiếu xét nghiệm:

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu.

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.

Lấy bệnh phẩm:

Theo đúng quy định của chuyên ngành vi sinh (xem Phụ lục 1 và Phụ lục 6).

Tiến hành kỹ thuật:

Ngâm tăm bông bệnh phẩm trong dung dịch trộn bệnh phẩm.

Nhỏ 200µl dung dịch pha loãng vào các giếng U, D, H.

Nhỏ 100µl dung dịch trộn bệnh phẩm vào các giếng U, X, H, D.

Trộn đều trong giếng D, hút 25µl sang các giếng U và H.

Dán khay thử và để vào tủ ấm với nhiệt độ 37ºC.

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Kết quả định danh:

Quan sát	Kết quả
Có sự đổi màu ở giếng H (hồng tím).	Nuôi cấy dương tính
Không có sự đổi màu.	Âm tính

Kết quả kháng sinh đồ:

Quan sát	Kết quả
Có sự đổi màu ở cả 2 giếng chứa cùng một loại kháng sinh.	R
Có sự đổi màu ở cả 1 trong 2 giếng chứa cùng một loại kháng sinh.	I
Không có sự đổi màu ở cả 2 giếng chứa cùng một loại kháng sinh.	S