✴️ Neisseria gonorrhoeae nuôi cấy, định danh và kháng thuốc

MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ

Mục đích:

Phát hiện và định danh V. cholerae bằng phương pháp nuôi cấy kinh điển.

Xác định mức độ nhạy cảm với kháng sinh của V. cholerae. 

Nguyên lý:

Vi khuẩn được định danh dựa vào đặc điểm nuôi cấy, một số tính chất chuyển hóa, các đặc điểm về hình thái học.

Mức độ nhạy cảm với kháng sinh của N. gonorrhoeae được xác định bằng phương pháp kháng sinh đồ khoanh giấy khuếch tán và được phiên giải ra phân loại S, I, R dựa trên tái liêu hướng dẫn CLSI được cập nhật hàng năm.

CHUẨN BỊ

Người thực hiện:

Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành vi sinh.

Người nhận định và phê duyệt kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành vi sinh.

Phương tiện, hóa chất:

Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.

Trang thiết bị:

Tủ an toàn sinh học cấp 2.

Kính hiển vi quang học.

Bàn phụ khoa.

Đèn phụ khoa.

Tủ ấm CO₂ 35 - 37ºC.

Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

Ghi chú: 

Chi phí nội kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo chương trình nội kiểm (QC) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lượng ≥ 10 mẫu cho 1 lần tiến hành kỹ thuật).

Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần / 1 năm).

Bệnh phẩm:

Dịch, mủ: Âm đạo, niệu đạo, họng, hậu môn…

Phiếu xét nghiệm:

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu.

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên.

Lấy bệnh phẩm:

Theo đúng quy định của chuyên ngành vi sinh (xem Phụ lục 1 và Phụ lục 6).

Tiến hành kỹ thuật:

Nuôi cấy bệnh phẩm trên môi trường Thayer – Martin.

Để vào tủ ấm 35 – 36 độ có 5% - 10% CO₂, độ ẩm > 80%.

Chọn khuẩn lạc nghi ngờ.

Phản ứng Oxidase (+).

Thử nghiệm tính chất sinh vật hóa học.

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Định danh Neisseria gonorrhoeae dựa vào:

Nhuộm Gram: Cầu khuẩn Gram âm, xếp đôi, hình hạt cà phê nằm trong và ngoài tế bào. 

Khuẩn lạc điển hình trên môi trường Thayer – Martin.

Tính chất sinh vật hóa học: Oxidase dương tính; lên men đường glucose.

NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

Vi khuẩn không mọc do nồng độ CO₂ và độ ẩm không đủ tiêu chuẩn.

Chất lượng môi trường Thayer – Martin không đủ tiêu chuẩn.

Bệnh viện Nguyễn Tri Phương - Đa khoa Hạng I Thành phố Hồ Chí Minh

  facebook.com/BVNTP

  youtube.com/bvntp